8. Днфг-проба для выявления кетокислот

К 0,25 мл мочи прибавить 1мл 0,2% раствора 2,4-ДНФГ в 2 N соляной кислоты.

Приготовление реактива: 3г 2,4-ДНФГ растворить в 1 литре 2N соляной кислоты (158 мл концентрированной HCl довести до 1л дистиллированной водой), нагреть на водяной бане на протяжении 12 часов. Полученную жидкость после охлаждения фильтровать.

Через 10 минут прибавить одинаковый объем этилового эфира. После смешивания эфир отобрать в другую пробирку, куда прибавить одинаковый объем 10% раствора карбоната натрия (Na₂CO₃). Содержание пробирки перемешать.

При окрашивании нижнего слоя в желтый или оранжевый цвет реакция считается положительной (присутствует фенилпировиноградная, имидазолпировиноградная, пировиноградная и другие кетокислоты).

Принцип реакции – способность кетокислот мочи вступать в реакцию с 2,4-ДНФГ с образованием окрашенных гидразонов. Интенсивность окраски оценивается визуально от 0 до ++++. При отрицательной пробе нижний слой остается бесцветным, при резко положительной - ++++ - окрашенный в темно-оранжевый почти коричневый цвет.