Биохимические и биологические и методы анализа Биохимические методы

Сущность биохимических методов анализа. Их место среди других аналитических методов. Краткая история биохимических методов, тенденции их развития.

Ферментативные методы анализа. Ферменты как биологические катализаторы. Классификация ферментов. Важнейшие сведения о структуре ферментов. Апоферменты, кофакторы, коферменты, простетические группы. Источники ферментов, их выделение и очистка. Субстратная специфичность ферментов. Фермент-субстратные комплексы. Активные центры. Кинетические и термодинамические закономерности ферментативных реакций. Механизмы ферментативного катализа. Уравнение Михаэлиса-Ментен. Эффекторы ферментов. Активаторы. Ингибиторы. Различные типы ингибирования ферментов. Индикаторные ферментативные реакции. Сопряженные системы из двух и более реакций.

Методы анализа, основанные на определении конечного количества продуктов реакции и на измерении начальной скорости реакции. Методы измерения скорости ферментативной реакции (спектроскопические, электрохимические, радиохимические, биолюминесцентные, термометрические).

Иммобилизованные ферменты и их применение в химическом анализе. Физические и химические методы иммобилизации. Биосенсоры. Ферментные электроды. Ферментативные тест-методы.

Чувствительность и избирательность определения субстратов ферментов и их эффекторов. Автоматизация ферментативных методов, применение ПИА. Области применения ферментативных методов. Ферменты, наиболее часто используемые в химическом анализе. Примеры определения органических и неорганических соединений – субстратов и эффекторов ферментов – в различных объектах: объектах окружающей среды, биологических жидкостях и биомассах, фармацевтических препаратах, пищевых продуктах.

Иммунный анализ. Сущность иммунного анализа. Понятия об антигене и антителе. Иммунный комплекс. Специфичность взаимодействия антител с антигенами. Иммунный анализ с разделением и без разделения компонентов (гетерогенный и гомогенный иммуноанализ). Метки в иммунном анализе – изотопные, ферментные, флуоресцентные, парамагнитные. Радиоиммунологический анализ. Иммуноферментный анализ. Ферменты, используемые в иммуноферментном методе анализа. Метрологические характеристики иммунных методов анализа. Области применения. Общие представления об использовании биохимических зондов (блот-гибридизация).