3.3 Изучение цитотоксичности наноматериалов для клеток линии А549 с помощью окраски метиленовым синим
Клетки линии А549 высевали в 24-луночные планшеты, куда вносили НЧ серебра. Для оценки жизнеспособности клеток использовали 0,4 % раствор метиленового синего. Окрашивание проводили через 8 и 24 ч после внесения наночастиц. Подсчет числа клеток проводили в 5 произвольных полях зрения, рассчитывали среднее значение Результаты эксперимента представлены в таблице 2.
Таблица 2 - Влияние НЧ серебра в различных концентрациях на жизнеспособность клеток линии А549
Вариант опыта |
Число клеток |
||||||
8 ч |
24 ч. |
||||||
Общее число клеток |
Число окрашенных клеток |
% гибель |
Общее число клеток |
Число окрашенных клеток |
% гибель |
||
НЧ серебра, 100 мкг/мл |
67,2 |
4,6 |
6,8 |
88,4 |
5,6 |
6,3 |
|
НЧ серебра, 300 мкг/мл |
74 |
29 |
37,3 |
42,2 |
32,6 |
77,2 |
Показано, что при увеличении времени воздействия эффект наночастиц серебра на клетки возрастает.
Можно сделать вывод о применимости метода окраски клеток в культуре метиленовым синим для определения цитотоксического действия НЧ путем оценки целостности мембран клеток.
- Введение
- 1. Наночастицы
- 1.1 Состояние проблемы
- 1.2 Определение наночастиц
- 1.3 Классификация наночастиц
- 1.4 Свойства наночастиц
- 1.5 Пути поступления и биокинетика наночастиц
- 1.6 Системные эффекты наночастиц
- 1.7 Иисследование цитотоксичности наночастиц
- 2. Объекты, методы исследований, приборы, оборудование
- 2.1 Наночастицы, используемые в экспериментах in vitro
- 2.1.1 Характеристика наночастиц серебра
- 2.2 Культуры клеток, используемые для изучения токсичности in vitro
- 2.2.1 Культура клеток карциномы легкого человека (А549)
- 2.2.2 Культура клеток амниона человека, сублиния FL
- 2.2.3 Культура лимфоцитов человека
- 2.2.4 Культура кардиомиоцитов крыс линии SHR
- 2.3 Методы изучения цитотоксичности наноматериалов в культурах клеток млекопитающих
- 2.3.1 Метилтетразолиевый тест
- 2.3.2 Метод оценки жизнеспособности клеток в культуре с помощью окраски трипановым синим (метиленовым синим)
- 2.3.4 Метод оценки жизнеспособности клеток в культуре с помощью определения активности ЛДГ
- 2.4 Перечень испытательного оборудования
- 3. Результаты исследований
- 3.1 Влияние наночастиц серебра на жизнеспособность клеток линий А549, SHR и сублинии FL по результатам МТТ-теста
- 3.2 Влияние наночастиц на жизнеспособность лимфоцитов человека по результатам МТТ-теста
- 3.3 Изучение цитотоксичности наноматериалов для клеток линии А549 с помощью окраски метиленовым синим
- 3.4 Изучение жизнеспособности клеток в культуре по активности лактатдегидрогеназы в среде культивирования
- Заключение
- Лабораторная работа № 3 Получение наночастиц серебра цитратно-сульфатным методом Кери-Ли
- Зависимость скорости формирования наночастиц серебра от концентрации ионов серебра.
- 4.Влияние наночастиц серебра на организм человека и окружающую среду.
- Наночастицы серебра убивают бактерии
- 1.2.1. Получение наночастиц серебра методом химического восстановления в растворах
- 1.2.1. Получение наночастиц серебра методом химического восстановления в растворах
- Глава 1. Обзор литературы
- 6.2. Токсичность